产品货号:
M20080
中文名称:
反转录预混液
英文名称:
RT mix for qPCR II
产品规格:
100T|500T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是一款高效、快速的反转录试剂盒。反转录产物cDNA可直接用于PCR或Real-Time qPCR,与2×SYBR Green qPCR预混液配合使用即可进行高性能的基因表达分析。
本制品为即用型预混液,含有反转录反应所需的所有组分(高性能反转录酶、RNase抑制剂、Oligo dT引物、随机引物、RT Buffer、dNTPs),只需加入RNA和RNase-free H2O即可快速高效完成反转录反应,减少操作过程中的污染几率。本品使用升级款逆转录酶,可耐受高达60℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的反转录;与模板的亲和力增强,适用于少量模板以及低拷贝基因的反转录反应。
组分 | 100T | 500T |
4×Super RT Mix | 500μL | 500μL×5 |
RNase-Free H2O | 1mL×2 | 1mL×1 |
保存:-20℃
- 4×Super RT Mix含有高浓度的甘油,使用前请短暂离心收集到管底部,并用移液枪轻轻吸打充分混匀后,准确吸取。
- 建议RNA模板溶解于水中。
- 反应液的配制,请在冰上操作完成。
- RNA相关操作等请使用全新RNase-free枪头、RNase-free离心管等实验耗材。建议RNA实验使用的器具、试剂和无菌水等专用,避免RNase污染。
- 高质量、完整的RNA对于获得高质量的cDNA至关重要,为保证反转录成功,请使用高质量的RNA模板。提取的Total RNA中常混有gDNA,而gDNA可以直接作为PCR模板进行扩增,造成解析结果不准确。请在引物设计时避免gDNA扩增,或在提取Total RNA后使用DNase I处理以除去gDNA,也可选购耐热反转录试剂盒,以消除gDNA对PCR扩增的影响。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 反转录反应体系配制
在RNase-free PCR管中,按下列组分配制RT反应液,反应液配制操作请在冰上进行。成分 用量 4×Super RT Mix 5μL Total RNA/mRNA 50pg~5μg/50pg~500ng RNase-Free H2O 至20μL - 反转录程序设置
将上述配制的反应体系混合均匀后,置于PCR仪中进行反应,具体程序如下:温度 时间 25℃ 5 mins 55℃ 15 mins 85℃ 2 mins - 反转录温度:推荐使用55℃。对于高GC含量模板或者结构复杂模板,可将反转录温度提高到60℃。
- 反应结束后,置于冰上冷却。
- 合成的cDNA可立即用于后续PCR或qPCR反应,也可-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。
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